北京安必奇生物科技有限公司

https://www.abace-biology.com/custom-genome-editing-cell-lines.htm

稳定细胞系在基因功能研究、重组蛋白制备、药物筛选及靶点验证、肿瘤治疗等生物学研究中发挥重要作用。安必奇生物专业的研发团队拥有丰富的细胞系构建和CRISPR/Cas9基因编辑项目经验，致力于为广大客户提供定制的基因编辑细胞系构建服务。我们的服务涵盖基因敲除细胞系、条件敲除细胞系、基因敲入细胞系、定点突变细胞系、基因激活/抑制细胞系。基于高效稳定的细胞转染系统和基因编辑系统，我们成功在不同细胞系实现基因编辑，包括但不限于易转染细胞或难转染肿瘤细胞，神经细胞，干细胞和其他细胞。

服务内容：

• 基因敲除细胞系

安必奇生物提供单基因敲除细胞系，多基因敲除细胞系和大片段删除细胞系定制服务。

• 条件敲除细胞系

基因的表达具有时空特异性，对体内关键基因进行敲除和替换等方式的基因编辑，往往导致动物胚胎死亡，阻碍基因的功能研究。条件性敲除可以使目标基因的表达或缺失发生在动物发育的某一特定阶段或某一特定组织器官。安必奇生物将Cre-LoxP重组系统与CRISPR/Cas9技术相结合，为广大客户提供稳定的条件敲除细胞系。

• 基因敲入细胞系

我们的基因敲入细胞系包括报告基因敲入细胞系和客户指定基因敲入细胞系，使用优化后的CRISPR/Cas9系统，我们成功为客户完成大片段基因敲入项目。

• 定点突变细胞系

利用CRISPR/Cas9技术，通过引入特定的修复模板，实现对目标基因碱基序列的定点修饰，包括碱基的添加、删除和替换。

• 基因激活/抑制细胞系

安必奇的利用dCas9-VP64/dCas9-KRAB基因稳定表达的单克隆细胞株，通过将启动子靶向的sgRNA导入dCas9-VP64/dCas9-KRAB稳定细胞株，从而实现靶向的内源基因激活/抑制。

定制基因编辑细胞系构建服务流程：

• 项目评估：评估目标基因敲除/敲入是否具有可行性，预实验检测靶细胞转染效率和单克隆生长能力。

• sgRNA设计与载体构建：设计多个sgRNA，构建载体，通过细胞实验筛选编辑效率较高的sgRNA。

• 细胞转染：将CRISPR载体或RNP利用电转法或病毒转染法导入受体细胞。

• 单克隆筛选与验证：测序验证基因水平敲除(默认方法)，FACS和WB验证蛋白水平敲除(可选)。

• 交付稳定细胞系：支原体检测无污染后，交付基因编辑细胞系。